Бледная трепонема (Treponema pallidum) является возбудителем сифилиса. Это венерическое заболевание известно с древних времен, однако его возбудитель был открыт только в 1905 году австрийскими учеными Э. Гоффманом и Ф. Шаудином. Его назвали бледной (pallidum) спирохетой.
Имея очень тонкое спиралевидное тело, бледные трепонемы легко проникают через слизистые оболочки и поврежденные кожные покровы в организм человека чаще при половом контакте, в том числе в извращенной форме, значительно реже — контактным путем или непосредственно с кровью. Бледные трепонемы поражают слизистые оболочки, кожные покровы и внутренние органы. После периода размножения на месте внедрения возбудителей сифилиса образуется первичная сифилома ( , «твердая» язва). Течение заболевания волнообразное и поэтапное.
Специфические после манифестного течения самопроизвольно исчезают, а далее вновь появляются, меняя свою окраску. Длительность рецидивирующего течения заболевания протекает около 2-х лет и является важнейшим признаком раннего сифилиса. Сифилиды, лишенные эпителия, содержат большое количество бледных трепонем. С годами заразность больных сифилисом уменьшается.
Бледная трепонема относится к отряду Spirochaetales, семейству Spirochaetaceae, роду Treponema. Спирохеты обладают уникальным строением и морфологией. Они широко распространены в природе. Это тонкие, довольно длинные, гибкие и подвижные бактерии. Патогенными для человека являются четыре подвида Treponema pallidum:
- Treponema pallidum pallidum вызывает сифилис.
- Treponema pallidum pertenue является причиной фрамбезии (невенерический сифилис, тропическая гранулема).
- Treponema carateum вызывает заболевание пинта.
- Treponema pallidum endemicum является причиной эндемического сифилиса (невенерический сифилис детского возраста, беджел).
Заболевания, вызванные патогенными трепонемами, имеют хроническое волнообразное течение. Сифилис распространен повсеместно, а пинта, фрамбезия и беджел встречаются только в тропических странах и имеют доброкачественное течение.
Рис. 1. Вид бледной трепонемы в электронном микроскопе.
Устойчивость возбудителей во внешней среде
- Бледная трепонема устойчива к низким температурам. До одного года выдерживает замораживание. Хранятся патогенные штаммы возбудителей в бескислородной среде при низких температурах (20 — 70°С) или высушенными из замороженного состояния.
- Трепонемы сохраняют свою вирулентность на предметах окружающей среды до момента высыхания. При температуре до 42°С активность бактерий вначале повышается, а затем они погибают. При нагревании до 60°С трепонемы сохраняют свою активность в течение 15 минут. Более 3-х суток возбудители сифилиса сохраняют свои патогенные свойства в трупном материале.
- Вне организма человека бактерии быстро погибают. При температуре 100°С они погибают мгновенно. Бледные трепонемы чувствительны к дезинфицирующим средствам и некоторым антибиотикам.
Рис. 2. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции.
Возбудители сифилиса в организме больного
В этот период бактерии находятся в очагах поражения и тканевой жидкости в спиралевидной форме, а сам больной становится распространителем инфекции. Особенно заразны больные во вторичном периоде — периоде рецидивного сифилиса. Периоды затихания заболевания связаны с тем, что большая часть трепонем находится внутриклеточно (в фагоцитах). В таком состоянии бактерии не способны размножаться и распространяться по организму.
Бледные трепонемы способны укрываться от негативного воздействия факторов окружающей среды, превращаясь в L-формы и цисты, что объясняет хроническое течение заболевания. На поздних стадиях сифилиса заразность больных минимальная. Общее количество возбудителей снижено. Реакция организма на инфекцию ослаблена.
Рис. 3. Микроскопия мазка, приготовленного методом серебрения. Возбудители сифилиса имеют темную окраску. В желтый цвет окрашены клетки инфицированных тканей.
Характеристика возбудителя: внешнее строение
Бледная трепонема по внешнему виду напоминает штопор. Она имеет 8 — 14 равной величины завитков, высота которых уменьшается на концах. Спиралевидная форма возбудителя сохраняется во всех случаях и при любых условиях. Длина микроорганизма составляет от 5 до 15 мкм, ширина — 0,2 мкм.
Рис. 4. На фото возбудитель сифилиса Treponema pallidum (вид в электронном микроскопе).
«Концевые» образования
Концы у большинства трепонем заострены. На них расположены выросты дискообразной формы (блефаропласты ) с прикрепленными к ним в количестве 10 — 11 фибриллами.
Фибриллы тянуться вдоль тела трепонемы и обвивают его, обеспечивая бактерии спиралевидную форму. С каждого конца отходит по 2 самостоятельных пучка фибрилл. Они располагаются под наружной стенкой, проходя над цитоплазматической мембраной. Под цитоплазматической мембраной также обнаружены фибриллы. Они более тонкие и многочисленные. Фибриллы наружного пучка обеспечивают трепонеме движение, они в два раза толще. Они представляют собой длинные трубочки, состоящие из белка флагелина, достаточно устойчивого к воздействию ряда ферментов. Фибриллы внутреннего слоя играют роль каркаса.
На одном из концов бактерии имеется два округлых образования (губчатое тело ). Оно обеспечивает активное проникновение бактерий в клетки хозяев.
Бледные трепонемы могут осуществлять поступательные (назад и вперед), вращательные, сгибательные, волнообразные (судорожные) и винтообразные движения.
Рис. 5. На фото бледная трепонема (культуральная форма).
Рис. 6. На фото бледные трепонемы с увеличением в 3000 раз (темнопольная микроскопия). Данный вид исследования позволяет регистрировать форму и движение живых бактерий.
Внутреннее строение бледных трепонем (ультраструктура)
Мукопротеидный «чехол»
Тело бактерии окружено слизевидным бесструктурным веществом (микрокапсулой). Эта мукополисахаридная субстанция защищает трепонемы от фагоцитов и антител. Капсульное вещество продуцируется самой трепонемой.
Цитоплазматическая мембрана
Цитоплазматическая мембрана бактерий выполняет ряд жизненно важных функций: транспортную, защитную, является местом локализации антигенов и ферментов, она принимает активное участие в делении клетки, L-трансформации и спорообразовании. Цитоплазматическая мембрана имеет трехслойное строение. Ее внутренний слой образует в протоплазматическом цилиндре многочисленные выросты, за счет чего осуществляется активный перенос извне питательных веществ. От состояния цитоплазматической мембраны зависит жизнедеятельность бактерий.
Протоплазматический цилиндр
Протоплазматический цилиндр находится под наружной стенкой. Структура цитоплазмы бледных трепонем мелкогранулярная. В прозрачную гиалоплазму погружены гранулы-рибосомы и множество пластинчатых структур. Рибосомы обеспечивают синтез белка в бактериальной клетке. В цитоплазме также присутствует нуклеотид, не имеющий ограничительной мембраны. Он тянется по всей длине протоплазматического цилиндра.
Мезосомы
Мезосомы являются производными цитоплазматической мембраны. Они занимают половину или целую ось поперечника трепонемы. Мезосомы снабжают энергией бактериальную клетку в точках усиленного роста при спорообразовании и делении. Их функция аналогична митохондриям. Мезосомы различаются по характеру строения, но количество их всегда очень большое.
Рис. 7. Ультраструктура бледной трепонемы. Мукопротеидный чехол сверху, далее трехслойная клеточная стенка, внутри — цитоплазматическая мембрана и цилиндр с нуклеотидом, мезосомами, рибосомами и другими включениями. На фото хорошо просматриваются фибриллы, идущие вдоль тела бактерии.
Размножение бледных трепонем
Размножение возбудителей сифилиса происходит путем поперечного деления. Деление бактериальной клетки длится около 33 часов и происходит только при температуре около 37 °C. Иногда бледные трепонемы делятся сразу на несколько частей.
Рис. 8. На фото бледные трепонемы.
Формы существования возбудителей сифилиса
В неблагоприятных условиях (воздействие антибиотиков, антител, физических и химических факторов окружающей среды, истощение питательной среды) бактерии трансформируются в L-формы, распадаются на зерна, образуют цисты и кокковые формы. В таких формах трепонемы могут длительно существовать в организме больного, а потом реверсировать, обуславливая рецидив сифилиса.
Бледные трепонемы в L-форме способны проникать в организм человека даже при отсутствии повреждений на коже и слизистых оболочках, проходят через фильтры, которые применяются при обработке кожи.
При заражении цист-формами бактерий отмечается удлинение инкубационного периода, возникновение скрытых форм заболевания и развитие устойчивости к антибактериальным препаратам.
Цисты
Неблагоприятные условия существования приводят к тому, что бледная трепонема превращается в цисту. Она сворачивается в клубок, а вокруг образуется бесструктурная прозрачная оболочка (чехол), состоящий иногда из нескольких слоев. Все морфологические элементы возбудителя при этом сохраняются. Существование цист покоя объясняет существование скрытых форм заболевания, длительное и вялое течение, устойчивость к антибактериальным препаратам. По мере давности заболевания количество цист увеличивается. Исследователями доказано, что цистообразование — это защитная реакция, обеспечивающая выживание и размножение возбудителей сифилиса.
L-формы
В L-формы трепонемы превращаются под воздействием целого ряда факторов. Трепонемы приобретают шаровидную форму, из-за блокировки синтеза истончается клеточная стенка, приостанавливается размножение, но сохраняется рост и интенсивность синтеза ДНК. В цитоплазме L-форм бактерий определяется гигантский нуклеотид, внутри которого находится большое количество нитей, содержащих ДНК.
- Спиралевидные формы бледных трепонем преобладают на ранних стадиях сифилиса. В этот период бактерии располагаются внеклеточно, интенсивно делятся, что делает их уязвимым к действию антибиотиков.
- Во вторичном периоде рецидивного сифилиса трепонемы располагаются не только внеклеточно, но и внутри фагоцитов, обнаруживается большое количество цист, более устойчивых к лечению.
- На поздних стадиях заболевания отмечается значительное снижение спиралевидных форм трепонем, увеличение числа цист и L-форм. Общее количество возбудителей снижено. Реакция организма ослаблена.
Рис. 9. Хорошо просматриваются бактерии в мазках, приготовленных методом импрегнации серебром (методика Левадити).
Бледные трепонемы под микроскопом
В цитоплазме возбудителей сифилиса находится большое количество гидрофобных компонентов, из-за чего они плохо прокрашиваются анилиновыми красителями. По методу Романовского-Гимзы бактерии окрашиваются в бледно-розовый цвет, за что получили название «бледные трепонемы».
- Хорошо просматриваются трепонемы с помощью фазово-контрастной (темнопольной) микроскопии. В свежеприготовленном мазке с живыми возбудителями в темном поле видны плавно изгибающиеся спиралевидные бактерии. От сапрофитных спирохет, которые встречаются в полости рта и на слизистых оболочках половых органов, бледные трепонемы отличаются равномерностью завитков, они более тонкие, осуществляют плавные волнообразные движения и способны сгибаться под углом.
- Хорошо просматриваются бактерии в мазках, приготовленных методом импрегнации серебром (методика Левадити). Трепонемы окрашиваются в черный цвет и хорошо видны на фоне окрашенных в желтый цвет клеток исследуемых тканей. Серебро осаждается на бактериальных клетках, увеличивая их диаметр.
- Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции. Бактерии в мазке, обработанные люминесцирующей сывороткой, светятся в ультрафиолетовых лучах люминесцентного микроскопа.
Рис. 10. На фото бледные трепонемы под микроскопом: импрегнация серебром (фото слева), микроскопия в темном поле (фото посередине), реакция иммунофлюоресценции (фото справа).
Культуральные свойства возбудителей сифилиса
Бледные трепонемы являются облигатными анаэробами — живут и растут в условиях отсутствия молекулярного кислорода. Бактерии практически не растут на искусственных питательных средах. Для их выращивания используются среды, содержащие лошадиную и кроличью сыворотки, на которых бледные трепонемы растут медленно и теряют вирулентные свойства. Рост происходит при температуре 35 0 С. Колонии возбудителей сифилиса появляются на 3 — 5 (на некоторых средах на 7 — 9) сутки.
Рис. 11. На фото рост колоний бледных трепонем.
Биохимические свойства бледных трепонем
Биохимические свойства возбудителей сифилиса изучены мало. Ряд штаммов продуцируют сероводород и индол. Некоторые штаммы разжижают желатин, другие — глюкозу, сахарозу, галактозу и мальтозу с образованием кислоты. Некоторые штаммы разлагают только глюкозу. Несколько штаммов возбудителей подвергают гемолизу эритроциты человека.
Рис. 12. На фото бледные трепонемы. Вид в электронном микроскопе.
Микробиологическая диагностика сифилиса
Практическая работа
Медицина и ветеринария
Название «бледная» трепонема получила из-за низкой способности к окраске. Существуют другие патогенные трепонемы: Т. pertenue - возбудитель фрамбезии, Т. carateum - возбудитель пинты, Т. bejel - возбудитель хронического генерализованного спирохетоза (беджель). Указанные возбудители и вызываемые...
Методические указания для студентов к практическому занятию № 36.
Тема занятия:
Цель: Изучение методов микробиологической диагностики, терапии и профилактики сифилиса.
Модуль 2 . Специальная, клиническая и экологическая микробиология.
Тема 36: Микробиологическая диагностика сифилиса.
Актуальность темы:
Возбудитель сифилиса
Сифилис - инфекционное венерическое заболевание, вызываемое Treponema pallidum, характеризующееся поражением кожи, внутренних органов, костей, нервной системы. Различают приобретенный и врожденный сифилис.
Таксономия. Возбудитель сифилиса - бледная трепонема (Treрonema pallidum) - открыт в 1905 г. Ф. Шаудинном и Э. Гоффманом; относится к семейству Spirochaetaceae, отделу Gracilicutes.
Морфология и тинкториальные свойства. Название «бледная» трепонема получила из-за низкой способности к окраске. Существуют другие патогенные трепонемы: Т. pertenue - возбудитель фрамбезии, Т. carateum - возбудитель пинты, Т. bejel - возбудитель хронического генерализованного спирохетоза (беджель). Указанные возбудители и вызываемые ими болезни чаще встречаются в регионах с жарким и влажным климатом. Бледная трепонема - тонкая бактерия спиралевидной формы, длиной от 4 до 14 мкм, с равномерными мелкими завитками (8-14 завитков); наряду со спиралевидной может иметь другие формы - в виде цист, гранул, L-форм; окрашивается по Романовскому-Гимзе в характерный слабо-розовый цвет. Движения от винтообразных до сгибательных.
Культивирование. Бледная трепонема - облигатный анаэроб, чрезвычайно прихотлива к питательным средам. Культивируемая на питательных средах трепонема - культуральная спирохета - отличается от патогенной меньшей вирулентностью, однако их антигены сходны, что используется при серодиагностике сифилиса.
Антигенная структура. Бледная трепонема характеризуется антигенными связями с другими трепонемами, а также липоидами тканей животных и человека. Установлено несколько антигенов у возбудителя, один из которых - липоидный антиген - идентичен липоидному экстракту бычьего сердца.
Резистентность. В окружающей среде бледная трепонема слабоустойчива; при 55 0 С гибнет в течение 15 мин, чувствительна к высыханию, свету, солям ртути, висмуту, мышьяку, пенициллину. На предметах домашнего обихода сохраняет заразительность до момента высыхания; хорошо сохраняется в ткани трупа.
Восприимчивость животных. Экспериментально патологический процесс можно вызвать в яичке и на коже кроликов, в коже у человекообразных обезьян.
Эпидемиология. Источник инфекции - больной человек. Заражение происходит преимущественно половым путем, редко - через предметы домашнего обихода (стаканы, зубные щетки, папиросы и др.), загрязненные отделяемым от больного; возможно заражение через поцелуи, молоко кормящей матери (бытовой сифилис), не исключены случаи заражения при переливании крови от доноров, больных сифилисом.
Патогенез и клиническая картина. Возбудитель сифилиса проникает в организм через кожу или слизистую оболочку, распространяется по органам и тканям, вызывая их поражение. Инкубационный период длится в среднем 3-4 нед. После инкубационного периода сифилис протекает циклически в виде первичного, вторичного и третичного периодов. В месте внедрения возбудителя (на половых органах, в ротовой полости и т.д.) появляется первичное поражение - твердый шанкр - резко отграниченное уплотнение с язвой на поверхности. Вторичный период сифилиса длится 3-4 года, характеризуется сыпью, нарушением общего состояния организма. Третичный период характеризуется поражением кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей, нервной системы: появляются образования, склонные к распаду, изъязвлению.
Иммунитет. Врожденного иммунитета к сифилису не существует. При сифилисе развивается нестерильный иммунитет; после излечения иммунитет не сохраняется, поэтому возможны повторные заболевания.
Для обнаружения бледной трепонемы в отделяемом твердого шанкра применяют микроскопию в темном поле. К концу первичного и во вторичном периоде становятся положительными сергологические реакции Вассермана, осадочные реакции Кана, цитохолевая и другие пробы, выявляющие антитела к бледной трепонеме. При массовых обследованиях применяют отборочную реакцию, или микрореакцию на стекле, с каплей крови или сыворотки и специальным антигеном. В исследовательских лабораториях используют также реакцию иммобилизации трепонем и другие современные методы.
Схема микробиологического исследования при сифилисе
Микроскопическое исследование Серодиагностика
(комплекс серологических реакций):
Реакция Вассермана
Реакция иммобилизации трепонем
Микроскопия нативного препарата РИФ
В темном поле
ОТВЕТ ОТВЕТ
Лечение. Наиболее эффективными антимикробными средствами являются антибиотики пенициллинового ряда. Применяют также препараты висмута, йода и др.
Профилактика. Специфическая профилактика отсутствует. Неспецифическая профилактика заключается в соблюдении правил гигиены, а также в проведении комплекса санитарно-гигиенических мероприятий общественного характера: учет больных сифилисом, госпитализация всех больных заразными формами, привлечение к обследованию всех членов семьи заболевшего, систематическое обследование групп риска, воспитание населения и т. д.
Конкретные цели:
Ознакомится с морфологией возбудителя сифилиса.
Определить особенности клинического течения сифилиса.
Определить понятия «тканевые» и «культуральные» трепонемы.
Трактовать результаты микроскопического исследования.
Изучить методы серологической диагностики сифилиса.
Ознакомиться с методами профилактики и специфической терапии.
Уметь:
- Забирать материал для исследования от больных
- Трактовать результаты микроскопического исследования
- Уметь проводить реакцию Вассермана
Теоретические вопросы:
1. Возбудитель.
- Свойства. Резистентность.
- Патогенность для человека и животных. Факторы патогенности, токсины.
- Патогенез заболевания у людей, иммунитет.
- Микробиологическая диагностика.
- Специфическая профилактика и лечение
2. Цели постановки реакции Вассермана.
3. Диагностическая ценность реакции Вассермана и осадочных реакций.
4. Механизм реакции Вассермана.
5. Особенности иммунитета при сифилисе.
Практические задания, которые выполняются на занятии:
- Микроскопия демонстрационных препаратов.
- Зарисовка демонстрационных микропрепаратов в протокол.
- Разбор схемы лабораторной диагностики.
- Оформление протокола.
Литература:
1. Коротяев А.И., Бабичев С.А., Медицинская микробиология, иммунология и ви-русология /Учебник для медицинских ВУЗов, Ст-Пб.: «Специальная литература», 1998.- 592с.
2. Тимаков В.Д., ЛевашевВ.С., Борисов Л.Б. Микробиология /Учебник.-2-е изд., перераб. и доп.- М.:Медицина, 1983,- 512с.
3. Пяткин К.Д. Кривошеин Ю.С. Микробиология с вирусологией и иммунологией.- Киев: Вища школа, 1992.- 431с.
4. Медицинская микробиология /Под редакцией В.И. Покровского.- М.:ГЕОТАР-МЕД, 2001.- 768с.
5. Руководство к практическим занятиям по микробиологии, иммунологии и вирусологии. /Под ред. М.П. Зыкова.- М. «Медицина». 1977. 288с.
6. Черкес Ф.К., Богоявленская Л.Б., Бельскан Н.А. Микробиология. /Под ред. Ф.К. Черкес. М.: Медицина, 1986. 512с.
7. Конспект лекции.
Дополнительная литература:
1. Макияров К.А. Микробиология, вирусология и иммунология.- Алма-Ата.: «Ка-захстан», 1974. 372с.
2. Тiтов М.В. Iнфекцiйнi хвороби.- К., 1995. 321с.
3. Шувалова Е.П. Инфекционные болезни.- М.: Медицина, 1990.- 559с.
4. БМЭ, Т. 1, 2, 7.
5. Павлович С.А. Медицинская микробиология в графах: Учеб. пособие для мед. ин-тов. Мн.: Выш. шк., 1986. 255с.
Краткие методические указания к работе на практическом занятии.
В начале занятия проводится проверка уровня подготовки студентов к занятию.
- Самостоятельная работа.
- постановка реакции Вассермана.
- Учет реакции Вассермана и запись в протокол.
- Разбор и запись схем лабораторной диагностики в протокол.
В состав самостоятельной работы входит также микроскопия демонстрационных препаратов и их зарисовка в протокол занятия.
В конце занятия проводится тестовый контроль и анализ итоговых результатов самостоятельной работы каждого студента.
Технологическая карта проведения практического занятия
|
№ п\п |
Этапы |
Время в мин. |
Способы обучения |
Оборудования |
Место проведения |
|
Проверка и кор-рекция выходно-го уровня подго-товки к занятию |
20 |
Тестовые задания выходного уровня |
Таблицы. Тесты по теме. |
Учебная комната |
|
|
Самостоятель-ная работа |
35 |
Граф логичной структуры |
Коллекция демонстрационных препаратов, биопрепаратов. |
||
|
Самоконтроль и коррекция усвоенного материала |
15 |
Целевые обучающие программы |
|||
|
Тестовый контроль |
15 |
Тесты |
|||
|
Анализ резуль-татов работы |
Алгоритм лабораторной работы:
Изучение схемы лабораторной диагностики сифилиса.
Микроскопия готовых мазков из культуральных и тканевых трепонем.
Ознакомление с правилами забора материала от больных для микроскопии исследуемого материала.
Микроскопия и анализ демонстрационных препаратов.
Зарисовка препаратов в протокол.
Запись схем лабораторной диагностики в протокол.
Оформление протокола.
Тестовый контроль и анализ результатов самостоятельной работы каждого студента.
Целевые обучающие задания:
1. В КВД поступил больной с диагнозом «первичный сифилис». Какой из перечисленных методов диагностики используют на данной стадии заболевания?
A . темнопольная микроскопия;
C . РП в геле
D . РА
E . непрямая иммунофлюоресценция
2. У больного отделения челюстно-лицевой хирургии при постановке реакции Вассермана она оказалась отрицательной. По каким из перечисленных результатов определяют феномен отрицательной РСК?
A . по агглютинации эритроцитов;
B . по наличию осадка эритроцитов;
C . по изменению цвета жидкости;
D . по образованию пленки
E . по наличию гемолиза в пробирках.
3. При обследовании больного КВД была выявлена папулезно-розеолезные высыпания на туловище и конечностях и увеличение лимфатических узлов. Предварительно установленный диагноз «сифилис». Каким методом лабораторной диагностики этот диагноз может быть подтвержден?
A . аллергическим;
B . биологическим;
C . бактериологическим;
D . бактериоскопическим;
E . ИФА
4. Во время приема врач-стоматолог обнаружил у больного в ротовой полости твердый шанкр. Какой из перечисленных методов лабораторной диагностики можно применить для постановки диагноза?
A . реакция иммобилизации трепонем
B . реакция Вассермана
C . реакция Кана
D . РА
E . бактериоскопический
5. В женскую консультацию пришла женщина на 8 неделе беременности. При обследовании у нее взяли кровь для проверки на наличие специфических антител к трепонемам. Какая из перечисленных ниже серологических реакций может быть использована для выявления антител к трепонемам?
A . реакция Райта
B . реакция Вассермана
C . реакция Видаля
D . реакция Борде-Жангу
E . РТГА.
6. Для подтверждения диагноза «сифилис» лаборант проводил серологическую реакцию, в которой использовал сыворотку крови больного, кардиолипидный антиген, комплемент и индикаторную систему. Как называется поставленная реакция?
A . реакция иммобилизации трепонем;
B . реакция Вассермана;
C . реакция Кана
D . РП
E . реакция иммунофлюоресценции.
7. При проведении серологической реакции на обнаружение антител к возбудителю сифилиса в сыворотке крови больного провели инкубацию трепонем с сывороткой пациента в анаэробных условиях, после чего бактерии потеряли подвижность. Какая реакция была поставлена и что она означает?
A . реакция Вассермана, пациент болен сифилисом;
B .реакция Вассермана, у пациента идет инкубационный период;
C . реакция иммобилизации трепонем, пациент болен сифилисом;
D . реакция непрямой иммунофлюоресценции, пациент болен сифилисом;
E . реакция иммобилизации трепонем, пациент когдато перенес сифилис.
8. Для серологической диагностики сифилиса с использованием реакции Вассермана врач-лаборант подготовил такие реактивы: кардиолипидный антиген, изотонический раствор натрия хлорида, гемолитическую систему. Какой еще компонент необходим для постановки этой реакции?
A . живые трепонемы;
B . эритроциты барана;
C . комплемент;
D . антиглобулиновая сыворотка;
E . диагностическая преципитирующая сыворотка.
9. В микропрепарате, приготовленном из пунктата лимфатических узлов больного, окрашенном по Романовскому-Гимзе, врач выявил тонкие микроорганизмы с 12-14 равномерными завитками бледно-розового цвета. Про возбудителя какого инфекционного заболевания может идти речь в данном случае?
A . возвратный тиф;
B . лептоспироз;
C . лейшманиоз
D . сифилис
E . трипаносомоз.
10. У больного с подозрением на первичный сифилис был взят соскоб со слизистой ротовой полости. При микроскопии мазка окрашенного по методу Романовского-Гимзе были выявлены извитые бактерии фиолетового цвета. Какой из нижеуказанных выводов является верным?
A . у пациента выявлена T . pallidum ;
B . у пациента обнаружены атипичные формы T . pallidum ;
C . у пациента выявлены непатогенные трепонемы;
D . был выбран неправильный метод окраски;
E . -
11. Врач-клиницист заподозрил у пациента первичный сифилис. Какой материал для исследований целесообразно забрать для подтверждения диагноза?
A . тканевую жидкость из твердого шанкра и пунктат лимфатических узлов;
B . соскоб из кожных высыпаний;
C . ликвор;
D . слизь из носа
E . слюну.
12. У больного с подозрением на вторичный сифилис на исследование была взята кровь. Какой метод диагностики целесообразно применить для подтверждения диагноза?
A . реакцию Видаля;
B . аллергическую пробу;
D . реакцию Борде-Жангу
E . бактериологический метод
C . реакцию непрямой иммунофлюоресценции .
А также другие работы, которые могут Вас заинтересовать |
|||
| 68128. | Слова в вірші – і рай в душі | 78.5 KB | |
| Мета: поглибити учнівські знання з теорії літератури ідейнохудожнього аналізу поетичного твору удосконалювати вміння виразного читання; розвивати поетичне мислення образну уяву; виховувати любов до художнього слова та до рідної природи. Я зачитуватиму поетичні рядки а ви повинні підставити... | |||
| 68129. | Інтелектуальна гра «Літературна веселка» Ти завжди в серцях людей, Тарасе! | 43.5 KB | |
| Шевченка розвивати логічне мислення виразне читання виховувати повагу до Шевченкового слова та цікавість до вивчення його творчості. Тарас Шевченко Тарас Це бунтівне пророче імя знайоме не тільки українцям а й усьому світові. Шевченко це криниця з джерельною водою яка втамовує духовну спрагу народу. | |||
| 68130. | Знайомство з країною Логікою | 28.5 KB | |
| Сьогодні діти ми відправляємось у незвичайну подорож. Діти ходять до школи найкоротшим шляхом але можуть годинами блукати різноманітними лабіринтами. Діти імітують посадку на автобус і їзду. Ось компанія яка У якій послідовності сидять діти Боря Петрик Юрко Віра Стас Іра. | |||
| 68131. | Аналогія. Добір малюнків за аналогією | 263.5 KB | |
| Тип уроку: урок засвоєння умінь і навичок Обладнання: геометричні фігури і предметні малюнки до гри Фотограф; індивідуальні набори геометричних фігур гралото малюнки з послідовністю. Міняю місцями фігури деякі взагалі прибираю. Всі фігури різного кольору А тепер відкрийте очі подивіться... | |||
| 68132. | Подорож по океану логічних завдань | 27.5 KB | |
| Мета: Познайомити дітей з різними поняттями; розвивати мислення, мову, пам’ять, спостережливість; виховувати сміливість, рішучість. Хід уроку Повідомлення теми і мети уроку. Сьогодні ми вирушаємо у кругосвітню подорож на кораблі. Нас чекає багато різних пригод. Людина – мисляча істота. Думки словами виражає. | |||
| 68133. | Сумісні та несумісні поняття. Завдання для повторення | 84.5 KB | |
| Мета: узагальнити й систематизувати знання учнів про поняття про сумісні та несумісні поняття вдосконалювати вміння учнів розвязувати логічні завдання розвивати логічне мислення кмітливість увагу память уяву; виховувати любов до тварин пробуджувати пізнавальний інтерес до всього живого формувати самоосвітні... | |||
| 68136. | МОДЕРНІЗАЦІЯ ВИЩОЇ ОСВІТИ УКРАЇНИ: МЕХАНІЗМИ ІНСТИТУЦІЙНОГО РЕГУЛЮВАННЯ | 188 KB | |
| Результативність та ефективність функціонування системи вищої освіти України на початку ХХІ століття забезпечуватиметься тільки у випадку, коли її не зв’язуватимуть вирішенням тимчасових завдань, породжених економіко-політичною нестабільністю, демографічною кризою, соціокультурним вакуумом. | |||
Начиная с 4-й недели от момента появления твердого шанкра, наступает серо-позитивный период, когда с целью диагностики сифилиса можно ставить различные серологические реакции. Особенность серологического метода заключается в том, что могут быть использованы неспецифический и специфический антигены (соответственно неспецифические и специфические реакции).
НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЕ ИЛИ РЕАГИНОВЫЕ ТЕСТЫ - в качестве антигена используют кардиолипиновый антиген (холестеринизированыий спиртовой экстракт из мышц бычьего сердца). Сюда относятся реакция связывания комплемента Вассермана, осадочные реакции, реакции микропреципитации.
СПЕЦИФИЧЕСКИЕ ИЛИ ТРЕПОНЕМАЛЬНЫЕ ТЕСТЫ основаны на выявлении в сыворотке крови больных антител к трепонемальному антигену (живые и убитые трепонемы, экстракты из трепонем). В качестве антигена могут быть использованы:
Б) ТРЕПОНЕМЫ НИКОЛЬСА ИЛИ ТКАНЕВЫЕ ТРЕПОНЕМЫ - патогенные трепонемы, полученные при заражении кролика в яички бледной трепонемой.
Из трепонемальных тестов в настоящее время чаще всего используют иммунофлюоресцентный адсорбционный тест (ИФАТ) и трепонемальную микрогемагглютинацию. В обоих случая сыворотку больного предварительно адсорбируют трепонемами Рейтера для удаления антител к общим для всех видов спирохет антигенам. В качестве антигена в ИФАТ используют трепонемы Никольса, а в микрогемагглютинации -эритроциты с сорбированными на них антигенами трепонемы Никольса.
К трепонемальным тестам относятся также РСК (в качестве антигена используют взвесь убитых трепонем - трепонемы-Никольса) и реакция иммобилизации трепонем.
^
ПОСТАНОВКА РЕАКЦИИ ВАССЕРМАНА
Для постановки реакции связывания комплемента по Вассерману при подозрении на сифилис необходимы следующие компоненты:
ИССЛЕДУЕМАЯ СЫВОРОТКА БОЛЬНОГО в разведении 1:5. Исследуемую сыворотку необходимо прогреть в течение 30 минут при температуре 56 градусов для разрушения (инактивации) комплемента.
НЕСПЕЦИФИЧЕСКИЙ АНТИГЕН - кардиолипиновый антиген - холестеринизированный спиртовой экстракт из сердечной мышцы быка.
КОМПЛЕМЕНТ - в качестве комплемента используют сыворотку морской свинки. Так как количество комплемента должно быть строго определенным, комплемент берут в рабочей дозе (титр, увеличенный на 25-30%). Титр комплемента - это минимальное его количество, при котором еще происходит гемолиз. Увеличение титра необходимо потому, что в реакции активность комплемента может быть подавлена другими ингредиентами реакции (спиртовой антиген и др.)
ГЕМОЛИТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА - это смесь гемолитической сыворотки и эритроцитов барана, которую перед постановкой РСК выдерживают в термостате при 37°С в течении 30 минут для адсорбции гемолизинов на поверхности эритроцитов.
^ Схема постановки реакции Вассермана
| Компоненты реакции | ste пробирки |
||
| 1 (опыт) | 2 (контроль АГ) | 3 (контроль AT) |
|
| Инактивированная исследуемая сыворотка (1:5) | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Кардиолипиновый антиген в рабочей дозе | 0,5 | 0,5 | - |
| Комплемент (в рабочей дозе) | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| Физиологический раствор | - | 0,5 | 0,5 |
Инкубация при температуре 137°С - 40 минут.
Результат реакции оценивают по степени задержки гемолиза: ++++ - резкоположительная реакция (полное отсутствие гемолиза) +++ - положительная реакция ++и+ - слабоположительная реакция - отрицательная реакция
^ Специфическая профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика предусматривает воздержание от случайных половых связей, раннее выявление больных, особенно со скрытой формой заболевания, и их своевременное и эффективное лечение. Для лечения сифилиса используют антибиотики: пенициллин и его производные (водорастворимые и дюрантные формы), иногда эритромицин. Используют также препараты висмута, мышьяка, ртути.
^ Проявления сифилиса в полости рта.
Сифилис - хроническое инфекционное заболевание, вызываемое бледной трепонемой. Сифилис характеризуется весьма своеобразным течением: во-первых, волнообразной сменой активных проявлений и периодов скрыто протекающей инфекции; во-вторых, постепенным и последовательным изменением клинической и патологоанатомической картины поражений органов и тканей от слабовыраженных воспалительных явлений до образования специфических глубоких инфекционных гранулем, сдавливающих и разрушающих органы и ткани, в которых они локализуются, что приводит к потере функции органа, а иногда и к смерти больного.
Различают приобретенный и врожденный сифилис. Врожденный сифилис возникает при попадании бледной трепонемы в организм плода через плаценту от больной сифилисом матери. Для заражения человека сифилисом необходимо проникновение бледной трепонемы через кожу или слизистую оболочку, целостность которой нарушена.
Обычно заражение происходит половым путем. Внеполовое заражение может быть профессиональным, например, у медицинских работников во время операций, вскрытий, стоматологического или гинекологического осмотра и т.д., или произойти при пользовании общей посудой, губной помадой, мундштуками и др.
В связи с волнообразным течением сифилиса, разным характером клинических и морфологических изменений, возникающих на различных этапах заболевания, различают инкубационный, первичный, вторичный и третичный периоды приобретенного сифилиса, а также скрытый, в том числе неведомый, висцеральный сифилис и сифилис нервной системы.
Инкубационный период сифилиса в среднем равен 3-4 нед., однако возможно как его укорочение (до 10-12 дней), так и удлинение (до 6 мес), которое обычно связано с приемом во время инкубации небольшого количества антибиотиков по поводу интеркуррентных заболеваний или гонореи.
^ Первичный период сифилиса начинается с возникновения на месте заражения, т.е. внедрения бледной трепонемы, твердого шанкра (первичная сифилома). Первичный период длится 6-7 нед. Спустя 5-7 дней после образования твердого шанкра появляется второй непременный симптом первичного периода - увеличиваются регионарные лимфатические узлы (бубон, или регионарный склераденит). В этих узлах происходит бурное размножение трепонемы. Из лимфатических узлов по лимфатическим путям уже в начале первичного периода трепонемы попадают в кровь, в ответ на это постепенно начинают вырабатываться антитела, которые в конце 3-й недели первичного периода сифилиса можно определить в крови с помощью классических серологических реакций (реакция Вассермана, осадочные реакции), несколько раньше - с помощью реакции иммунофлюоресценции (РИФ), а несколько позднее - и с помощью реакции иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, или РИТ).
Примерно у 20% больных к концу первичного периода сифилиса развиваются общие симптомы (повышение температуры тела до 38-38,5°С, слабость, головная боль, боли в костях, особенно по ночам), в периферической крови наблюдаются небольшая анемия, лейкоцитоз, увеличение СОЭ. Спустя 4-6 дней на этом фоне на коже туловища, а нередко и на слизистой оболочке полости рта появляется сыпь, что свидетельствует об окончании первичного и начале вторичного периода сифилиса.
Слизистая оболочка полости рта и красная кайма губ являются локализацией сифилитических высыпаний во всех стадиях заболевания, в том числе и при первичном сифилисе. При внеполовых заражениях локализация шанкра на губах и слизистой оболочке полости рта встречается наиболее часто. Твердый шанкр может возникнуть на любом участке красной каймы губ или слизистой оболочки полости рта, но чаще всего он локализуется на губах, языке, миндалинах.
Развитие твердого шанкра на губе или слизистой оболочке полости рта, как и на других местах, начинается с появления ограниченной красноты, в основании которой в течение 2-3 дней возникает уплотнение за счет воспалительного инфильтрата. Это ограниченное уплотнение постепенно увеличивается и достигает обычно 1-2 см в диаметре. В центральной части поражения происходит некроз и образуется эрозия мясо-красного цвета, реже - язва. Достигнув полного развития в течение 1 -2 нед, твердый шанкр на слизистой оболочке обычно представляет собой круглую либо овальную, безболезненную эрозию мясо-красного цвета или язву с блюдцеобразными краями размером от 3 мм (карликовые шанкры) до 1,5 см в диаметре с плотноэластическим инфильтратом в основании. В соскобе поверхности шанкра легко обнаруживаются бледные трепонемы. Иногда эрозии покрыты серовато-белым налетом. При расположении шанкра на губах иногда образуется значительный отек, вследствие которого губа отвисает, а шанкр держится дольше, чем на других местах. Чаще развивается один твердый шанкр, реже - два и более. Если присоединяется вторичная инфекция, то эрозия может углубляться, при этом образуется язва с грязно-серым некротическим налетом.
На языке твердый шанкр обычно бывает одиночным, возникает чаще в средней трети. Помимо эрозивной и язвенной форм, у лиц со складчатым языком, при локализации твердого шанкра вдоль складок может возникнуть щелевидная форма. При расположении твердого шанкра на спинке языка из-за значительного инфильтрата в основании шанкр обычно резко выступает над окружающей тканью, на его поверхности имеется мясо-красная эрозия. Обращают на себя внимание отсутствие воспалительных явлений вокруг шанкра и его безболезненность.
Твердый шанкр в области десен имеет вид ярко-красной гладкой эрозии, которая в виде полулуния окружает один-два зуба. Язвенная форма твердого шанкра десны очень сходна с банальным изъязвлением и почти не имеет каких-либо признаков, характерных для первичной сифиломы. Диагностику облегчает наличие бубона в подчелюстной области.
При локализации на миндалине твердый шанкр может иметь одну из трех форм: язвенную, ангиноподобную (амигдалит) и комбинированную - язвенную на фоне ангиноподобной. Поражается миндалина на одной стороне. При язвенной форме миндалина увеличена, плотная, на этом фоне наблюдается мясо-красная овальная язва с пологами ровными краями. Слизистая оболочка вокруг язвы гиперемирована. Процесс сопровождается болевыми ощущениями, иногда значительными. При ангиноподобном шанкре эрозия или язва отсутствует, имеется одностороннее значительное увеличение миндалины. Она приобретает медно-красный цвет, безболезненная, плотная. Процесс отличается от ангины односторонностью поражения, отсутствием болей и острой воспалительной гиперемии. Общих явлений нет, температура тела нормальная.
Шанкр на губах следует дифференцировать от простого пузырькового лишая, при котором в отличие от сифилиса высыпаниям предшествует жжение или зуд, эрозия располагается на гиперемированном, слегка отечном основании и имеет микрополициклические очертания. Кроме того, при пузырьковом лишае эрозивным высыпаниям предшествуют пузырьки, которые никогда не возникают в процессе формирования шанкра. В отличие от твердого шанкра герпетические эрозии почти всегда характеризуются быстрым возникновением и быстрой эпителизацией, кроме того, герпес в отличие от твердого шанкра часто имеет рецидивирующее течение. Следует учесть, что при длительном существовании герпетической эрозии на губе в ее основании появляется инфильтративное уплотнение, что усиливает сходство эрозии с первичной сифиломой.
^ Вторичный период сифилиса начинается через 6-7 нед. после появления твердого шанкра, когда на фоне симптомов, свойственных первичному периоду сифилиса (твердый шанкр, регионарный склераденит, полиаденит), появляется обильная розеолезно-папулезная сыпь. Вторичный период сифилиса продолжается в течение 3-5 лет и сопровождается положительными серологическими реакциями. Особенностью вторичного периода сифилиса является волнообразное течение, когда периоды активного проявления болезни сменяются периодами скрытого, бессимптомного течения болезни, причем продолжительность каждого из этих периодов индивидуальна (в среднем по 1,5-2 мес).
Активная стадия заболевания, развивающаяся в начале вторичного периода сифилиса вследствие генерализации инфекции, характеризуется большим количеством розеолезно-папулезных, а иногда и пустулезных высыпаний, полиаденитом, склераденитом, остатками твердого шанкра и носит название вторичный свежий сифилис. К концу периода вторичного свежего сифилиса разрешается твердый шанкр, исчезают розеолезно-папулезные высыпания, ликвидируется регионарный склераденит и полиаденит.
Слизистая оболочка полости рта является частым местом локализации сифилидов вторичного периода, причем при вторичном рецидивном сифилисе высыпания во рту могут быть единственным клиническим проявлением болезни. Почти у половины больных с явлениями вторичного сифилиса наблюдаются поражения слизистой оболочки рта в виде розеолезных и папулезных элементов, пустулезные высыпания на слизистой оболочке рта возникают крайне редко.
Розеолезные высыпания на слизистой оболочке рта возникают симметрично на дужках, мягком небе, язычке и миндалинах. Особенностью розеолезных высыпаний в этой области является то, что они сливаются в сплошные очаги поражения (эритематозная ангина). Пораженная область имеет застойно-красный цвет, иногда с медным оттенком, резкие границы. Слизистая оболочка в этой области слегка отечна; больные ощущают неловкость при глотании, болезненность, но субъективные ощущения могут и отсутствовать. Разрешение эритематозной ангины начинается с центральной части.
Наиболее частым проявлением вторичного сифилиса на слизистой оболочке рта являются папулезные высыпания. Они могут возникать в любом месте слизистой оболочки, но чаше на миндалинах, дужках, мягком небе, где нередко папулы сливаются в сплошные очаги поражения (папулезная ангина), языке, слизистой оболочке щек, особенно по линии смыкания зубов, деснах и т.д. Вид папул зависит от длительности их существования. Вначале папула - резко ограниченный темно-красный очаг размером до 1 см в диаметре с небольшим инфильтратом в основании. Спустя некоторое время образующийся в результате происходящего воспаления экссудат пропитывает покрывающий папулу эпителий, и она приобретает весьма характерный вид.
^ Третичный период сифилиса наблюдается далеко не у всех больных, даже если они не лечатся. Он начинается через 4-6 лет после начала заболевания в связи с изменением реактивности организма, чувствительности его к бледной трепонеме и т.д. и имеет злокачественное течение. Третичный период может продолжаться десятилетиями, характеризуется развитием воспалительных инфильтратов (гумм и бугорков), склонных к распаду и нередко вызывающих значительные деструктивные, порой несовместимые с жизнью изменения в органах и тканях. В то же время высыпания третичного сифилиса не заразны для окружающих, так как в их отделяемом отсутствуют бледные трепонемы.
В третичный период сифилиса на слизистой оболочке рта могут появиться гуммы, гуммозная диффузная инфильтрация и бугорковые высыпания. При этом слизистая оболочка может быть единственным местом клинического проявления заболевания.
Гуммозный сифилид может локализоваться в любом месте слизистой оболочки рта. Чаще гуммы образуются на мягком и твердом небе и языке. Обычно гумма появляется в единственном числе. Вначале образуется безболезненный узел, который постепенно увеличивается, а затем вскрывается. Отторгается гуммозный стержень, после чего образуется гуммозная язва. Этот процесс длится 3-4 мес, иногда сопровождаясь незначительными субъективными ощущениями. Невскрывшаяся гумма имеет плотную консистенцию, гладкую поверхность, слизистая оболочка над узлом умеренно воспалена, она имеет застойно-красную резко ограниченную окраску. После отделения стержня гуммозная язва имеет кратерообразную форму, плотные края, безболезненна, дно ее покрыто грануляциями. Язва постепенно заживает с образованием звездчатого втянутого рубца. При локализации на небе на месте гуммы нередко образуется перфорация, сохраняющаяся после разрешения процесса.
На твердом небе гумма обычно располагается по средней линии. Вследствие того, что слизистая оболочка тонка и интимно связана с надкостницей неба начинающийся гуммозный процесс очень быстро переходит на периост и кость. Инфильтрат гуммы быстро распадается, и обнажается кость, которая некротизируется и секвестрируется, возникает сообщение между полостями рта и носа.
Лечение больного сифилисом может быть начато только после подтверждения клинического диагноза обнаружением бледных трепонем при первичном и вторичном сифилисе или положительными серологическими реакциями. Под влиянием противосифилитического лечения высыпания быстро исчезают, причем уже через 8-10 ч после начала пенициллинотерапии бледные трепонемы не обнаруживаются на поверхности высыпаний. В связи с этим больные сифилисом через 10-12 ч после начала лечения пенициллином практически не заразны при бытовом контакте, а также при осмотре их врачами, в том числе стоматологами.
Стоматолог в своей практике может столкнуться с больным третичным сифилисом, у которого единственным проявлением заболевания могут оказаться гуммозные или бугорковые высыпания на слизистой оболочке рта. Лечение таких больных нельзя начинать с введения пенициллина, так как он вызовет реакцию обострения, которая будет стимулировать быстрое рассасывание сифилитических высыпаний, что может привести к катастрофе, даже к смерти больного, если такие высыпания локализуются в жизненно важных органах. Это связано с тем, что при таком лечении рассасывание инфильтрата произойдет за 2-3 дня, в течение которых не успеет образоваться замещающая их соединительная ткань. В связи с этим лечение больных третичным сифилисом всегда следует начинать с приема йода в течение 2-4 нед, затем вводят половину курсовой дозы препарата висмута и лишь потом пенициллин, после чего вторую половину курсовой дозы препарата висмута; второй и последующие курсы лечения начинают, как обычно, т.е. с пенициллина.
Стоматолог может встретиться с больным, который перенес третичный или поздний врожденный сифилис и у которого имеется перфорация неба, требующая пластической операции. Следует иметь в виду, что больные сифилисом после окончания лечения 5 лет находятся на диспансерном учете, в течение этого времени у них определяют излеченность сифилиса. В связи с этим пластическую операцию таким больным следует делать после снятия их с учета. Если же возникает необходимость в операции до этого срока, то оперативное вмешательство необходимо проводить под защитой пенициллина, в этом случае величину суммарной дозы препарата определяют коллегиально с венерологом, под наблюдением которого находится больной.
При лечении проявлений сифилиса в полости рта могут возникнуть осложнения, связанные с применением пенициллина и препаратов висмута. Пенициллин и его препараты могут вызвать острый аллергический медикаментозный стоматит, в связи с которым необходимо прекратить введение пенициллина, и кандидоз. Последнее осложнение у больных сифилисом не требует обязательной отмены пенициллина. Осложнениями от препаратов висмута являются висмутовая кайма, висмутовый гингивит и стоматит.
В зависимости от локализации воспалительного процесса поражение слизистой оболочки полости рта называется различно: стоматит (слизистая щек), глоссит (язык), гингивит (десны), хейлит (губы). Стоматиты обычно являются либо следствием различных дистрофических процессов в организме, инфекционных или соматических заболеваний, либо результатом повреждающего физического или химического воздействия на слизистую при вторичной роли резидентной микрофлоры. При поверхностных катаральных стоматитах обычно обнаруживают Гр + аэробные кокки и палочки, при глубоких стоматитах преобладает строго анаэробная Гр - флора (фузобактерии, бактероиды, пептострептококки).
При язвенно-некротических стоматитах преобладает анаэробная флора, преимущественно фузобактерии и спирохеты, однако могут присутствовать и другие микроорганизмы (вейллонелы, пептострептококки, бактероиды, вибрионы, актиномицеты). К фузоспирохетозам также относят язвенно - некротическую ангину Венсана, ангину Людвига, гангрену легкого, язвенный колит и др.).
В последние годы отмечается рост заболеваемости кандидомикозом. Это связано с широким применением антибиотиков, кортикостероидов, цитостатиков. Длительное их применение приводит к нарушению состава нормальной микробной флоры (дисбактериоз). Грибы кандида являются резидентом слизистых оболочек полости рта, пищеварительного тракта, дыхательных путей, влагалища, кожных покровов.
Процесс взаимоотношения дрожжевых клеток с эпителиальными клетками слизистой оболочки рта начинается с их адгезии. Сахароза, мальтоза, глюкоза и другие углеводы повышают активность адгезии. Адгезивность дрожжеподобных грибов рода Candida во многом определяет их вирулентность.
Система комплемента, которая активизируется маннаном клеточной стенки дрожжей, ингибирует их адгезию. Дрожжеподобные грибы способствуют разрушению зубной эмали и развитию кариеса. Кариозные зубы, в которых вегетируют дрожжевые клетки, можно рассматривать, как своеобразную экологическую нишу-, благодаря которой они могут участвовать в развитии микотических тонзиллитов и стоматитов. Местные проявления кандидоза или первичный кандидоз в полости рта протекает в форме острого псевдомембранозного кандидоза (молочницы), острого или хронического кандидоза и гиперпластического кандидоза.
Тестовые задания:
Таксономическое положениевозбудителя сифилиса:
класс;
семейство;
Серологические реакции, применяемые при диагностике сифилиса:
реакция Вассермана;
осадочные;
Основной метод диагностики возвратных тифов:
бактериоскопический;
серологический;
аллергический.
Методы окраски спирохет:
Грама;
Серебрение;
Нейссера;
Романовского-Гимзы;
Гинса.
Материал для диагностикилептоспирозов:
Кровь;
Испражнения;
Моча;
Рвотные массы.
Риккетсии;
Грибы;
Боррелии;
Вирусы;
Микоплазмы.
^ СИТУАЦИОННЫЕ ЗАДАЧИ:
Задача 1. Мужчина 40 лет обратился к врачу на 8-ой день болезни. Несколько дней назад он купался в реке, выше по течению которой было место водопоя скота. Среди животных в данной местности регистрировались заболевания лептоспирозом. Врач заподозрил возможность лептоспироза.
Какой материал на данном этапе болезни необходимо взять у больного и с помощью какого микробиологического метода можно поставить диагноз?
Задача 2. У больного, обратившегося в кожно-венерологический диспансер, обнаружен твердых шанкр. Какое микробиологическое исследование позволит поставить диагноз сифилиса на данном этапе болезни?
Занятие № 11.
Тема занятия: «Микробиологическая диагностика микоплазмозов и хламидиозов».
План занятия:
Морфологические и биологические свойства микоплазм и хламидий.
Методы диагностики хламидиозов.
Методы диагностики микоплазмозов.
Тестовый контроль: «Патогенные спирохеты, микоплазмы, хламидии».
Хламидии и хламидиозы
При окрашивании по Романовскому-Гимзе они приобретают голубой или фиолетовый цвет. Однако хламидии хорошо видны и в неокрашенном состоянии при микроскопии влажных препаратов под стеклом с помощью фазовоконтрастной оптической системы. В оптимальных условиях роста в эукариотных клетках жизненный, цикл хламидий составляет 17-70 ч. Хламидии хорошо размножаются в желточном мешке куриных эмбрионов при температуре от 33 до 41 С (в зависимости от вида), а также в культурах клеток различных позвоночных.
Chlamydia pneumoniae
Респираторный хламидиоз – инфекционное заболевание, вызываемое хламидиями, проявляющееся в виде пневмонии (хламидийная пневмония), катара верхних дыхательных путей и общей интоксикации.
Возбудитель - Chlamydia pneumoniae - имеет родовой антиген, общий с антигенами других видов, белковый видоспецифический и, возможно, типоспецифические антигены. Жизненный цикл аналогичен циклу других хламидий, но элементарные тельца имеют не сферическую, а грушевидную форму, образующуюся за счет расширенного периплазматического пространства. Кроме того, С. pneumoniae не синтезируют гликоген в своих микроколониях. Хламидий этого вида скудно размножаются в желточных мешках куриных эмбрионов и в культурах клеток. Обладают выраженным тропизмом к эпителию дыхательных путей.
Болезнь широко распространена. Эпидемические вспышки отмечены во многих странах Западной Европы, Америки и в Австралии. Источником инфекции является больной человек. Возбудитель выделяется с отделяемым носоглотки. Механизм заражения - воздушно-капельный. Восприимчивость людей к возбудителю высокая, у детей и престарелых заболевание протекает в более тяжелой форме; у молодых людей - чаще в виде легких форм. Основная клиническая форма болезни - мелкоочаговая и (или) интерстициальная пневмония, выявляемая рентгенологически.
Лечение. Наиболее эффективны антибиотики: тетрациклины, макролиды, угнетающие размножение возбудителя.
Лабораторная диагностика хламидиозов
Поскольку хламидиозы распространены глобально, а их клинические проявления очень разнообразны, особое значение в диагностике этих заболеваний имеют лабораторные методы. В зависимости от формы болезни материалом для исследования служат: соскобы с конъюнктивы, экссудат из бубонов, смывы из носоглотки, уретры, материал, взятый тампоном со слизистой оболочки дыхательных, мочеполовых путей, мокрота, кровь (во время лихорадки), а также секционный материал (кусочки печени, селезенки, легких и других тканей).
^ Бактериологическая диагностика состоит из предварительного микроскопического исследования материала, выделения возбудителя и его идентификации. Предварительное исследование заключается в бактериоскопии с целью обнаружения хламидий в инфицированных клетках либо с помощью прямой или непрямой иммунофлуоресценции, либо с использованием фазово-контрастной оптики, либо с применением окраски по Романовскому-Гимзе. Для выделения возбудителя исследуемым материалом заражают культуры клеток (лучше всего L-929, McCoy, HeLa) или куриные эмбрионы. Для подавления роста бактерий исследуемый материал обрабатывают гентамицином, стрептомицином и канамицином. Зараженные культуры клеток инкубируют при 35-36 °С в течение 6 дней, а затем микроскопируют с помощью фазового контраста, иммунофлуоресценции, ставят пробу на гликоген и определяют принадлежность к роду Chlamydia с помощью РСК с групповым антигеном. РСК считается положительной в разведении 1:8. При заражении куриных эмбрионов исследуют желточные мешки эмбрионов, погибших в течение 4-10 дней. При отсутствии бактериального загрязнения микроскопируют препараты, окрашенные по Романовскому-Гимзе, и определяют в суспензии из желточного мешка наличие группового антигена в РСК. В случае выделения C . trachomatis производят определение серотипа. Для этой цели сыворотку морской свинки, от которой выделен данный штамм, испытывают с прототипными антигенами известных 15 серотипов с помощью метода непрямой иммунофлуоресценции.
Для обнаружения хламидий применяют также биологический метод - исследуемым материалом заражают белых мышей и морских свинок, так как некоторые штаммы C . psittaci патогенны для мышей, но не для свинок, и наоборот, некоторые штаммы C . trachomatis (серотипы А, В и С) не размножаются в организме мышей, но патогенны для свинок.
Новорожденные мыши погибают при внутримозговом их заражении через 5-10 дней от геморрагического менингита, при интраназальном - через 5-10 дней от пневмонии. У мышей и свинок при внутрибрюшинном заражении увеличиваются печень, селезенка, а в брюшной полости образуется фибринозный экссудат. При микроскопическом исследовании у животных, зараженных разными способами, обнаруживаются микроколонии хламидий в мононуклеарных клетках ликвора (при внутримозговом), легких (при интраназальном), селезенке, печени и в перитонеальном экссудате (при внутри-брюшинном заражении). В связи с тем, что С. pneumoniae плохо размножаются в культурах клеток и куриных эмбрионах, для их обнаружения и идентификации используют моноклональные антитела к видоспецифическому антигену в реакциях иммунофлуоресценции.
Для серологической диагностики пситтакоза (орнитоза) и венерического лимфогранулематоза применяют РСК и непрямую иммунофлуоресценцию. Комплементсвязывающие антитела появляются через 4-8 дней в небольшом количестве, затем титр их возрастает. Поэтому РСК лучше ставить с парными сыворотками. В связи с наличием у хламидий родового антигена специфичность и чувствительность серологических реакций может быть повышена на основе использования моноклональных антител и выявленных с их помощью наиболее специфических для каждого вида (и серотипа) антигенов-диагностикумов.
Для диагностики хламидиозов могут быть использованы и внутрикожные аллергические пробы, но степень их специфичности зависит от степени специфичности аллергенов, так как могут быть перекрестные реакции за счет общих групповых антигенов.
Учебник состоит из семи частей. Часть первая – «Общая микробиология» – содержит сведения о морфологии и физиологии бактерий. Часть вторая посвящена генетике бактерий. В части третьей – «Микрофлора биосферы» – рассматривается микрофлора окружающей среды, ее роль в круговороте веществ в природе, а также микрофлора человека и ее значение. Часть четвертая – «Учение об инфекции» – посвящена патогенным свойствам микроорганизмов, их роли в инфекционном процессе, а также содержит сведения об антибиотиках и механизмах их действия. Часть пятая – «Учение об иммунитете» – содержит современные представления об иммунитете. В шестой части – «Вирусы и вызываемые ими заболевания» – представлены сведения об основных биологических свойствах вирусов и о тех заболеваниях, которые они вызывают. Часть седьмая – «Частная медицинская микробиология» – содержит сведения о морфологии, физиологии, патогенных свойствах возбудителей многих инфекционных заболеваний, а также о современных методах их диагностики, специфической профилактики и терапии.
Учебник предназначен для студентов, аспирантов и преподавателей высших медицинских учебных заведений, университетов, микробиологов всех специальностей и практических врачей.
5-е издание, исправленное и дополненное
Книга:
| <<< Назад
|
Вперед >>>
|
Бледная трепонема – возбудитель сифилиса
Сифилис – циклически протекающее венерическое заболевание человека, вызываемое бледной спирохетой; I стадия проявляется твердым шанкром (фр. chancre – язва), II стадия – поражением стенки сосудов и различными сыпями, III – гуммами в различных органах с поражением нервной системы. Гумма (лат. gummi – камедь) – хронический инфильтрат в виде узла, склонный к распаду и изъязвлению. Сифилитическая гумма (син .: сифилитическая гранулема, сифилид гуммозный, сифилома третичная) – безболезненная полушаровидная гумма, являющаяся проявлением третичного активного сифилиса. Возбудитель – Treponema pallidum – был открыт в 1905 г. Ф. Шаудином и Э. Гофманом.
T. pallidum – микроорганизм спиралевидной формы, размерами 0,09 – 0,18 ? 6 – 20 мкм. Число завитков спирали от 8 до 12, завитки равномерны, расположены друг от друга на одинаковом расстоянии около 1 мкм, высота по направлению к концам уменьшается. В электронном микроскопе имеет вид змеи или дождевого червя. На обоих концах трепонемы расположены блефаропласты с прикрепленными к ним жгутиками, число которых варьирует от двух до нескольких, они образуют осевую нить, закрученную вокруг протоплазматического цилиндра спирохеты. При неблагоприятных условиях может образовывать цисты. В организме животных может возникать мукополисахаридной природы капсулоподобный чехол.
Трепонема плохо окрашивается анилиновыми красителями, в связи с чем возбудитель сифилиса и получил название бледной спирохеты. Восстанавливает нитрат серебра в металлическое серебро, которое откладывается на поверхности микроба и делает его видимым в тканях: при окраске по Морозову трепонемы выглядят коричневыми или почти черными. При окраске по Романовскому – Гимзе приобретают бледно-розовый цвет.
Трепонемы обычно размножаются поперечным делением, при этом разделившиеся клетки могут в течение некоторого времени прилегать друг к другу. Время деления – около 30 ч.
Живые трепонемы очень подвижны, совершают движения вокруг собственной продольной оси, а также сгибательное, волнообразное и поступательное движение.
До настоящего времени пока нет такого метода, при котором бы удавалось стабильно получать культуры трепонем. Патогенные для человека бледные трепонемы никогда не удавалось культивировать на искусственных питательных средах, в куриных эмбрионах или культурах клеток. Те разновидности их штаммов, которые растут в анаэробных условиях, являются, вероятно, сапрофитными спирохетами, близкими к возбудителю сифилиса. Физиология их остается мало изученной. Трепонемы относятся к хемоорганотрофам, не имеют каталазы и оксидазы, могут сбраживать углеводы. Они растут на очень богатых средах, содержащих до 11 аминокислот, витамины, соли, сывороточный альбумин. Наилучшим способом выращивания патогенных спирохет является заражение кролика в яичко (экспериментальный орхит). Высказано предположение о существовании у T. pallidum жизненного цикла, включающего, помимо спиралевидной формы, зернистую стадию и стадию кистоподобных сферических тел. Именно зернистые формы этих микроорганизмов способны проходить через бактериальные фильтры.
Антигены трепонем плохо изучены. Установлено, что в составе трепонем имеются белковые, полисахаридные и липидные комплексы. Антигенный состав культуральных и тканевых трепонем настолько близок, что антигены, приготовленные из культуральных трепонем, можно использовать для РСК при диагностике сифилиса. В организме человека трепонемы стимулируют выработку антител, которые вызывают иммобилизацию и гибель живых подвижных трепонем, связывают комплемент в присутствии суспензии T. pallidum или родственных спирохет, а также выявляются в непрямой РИФ.
Возбудитель сифилиса не образует экзотоксинов. К внешним воздействиям бледные трепонемы относительно малоустойчивы. Быстро погибают при высушивании и при повышенных температурах (при 55 °C в течение 15 мин). В 0,3 – 0,5 % растворе HCl моментально утрачивают свою подвижность; так же быстро утрачивают ее и погибают в присутствии препаратов мышьяка, висмута, ртути. В цельной крови или в сыворотке при 4 °C сохраняют жизнеспособность в течение 24 ч, что следует учитывать при переливании крови.
Эпидемиология. Сифилис – типичное венерическое заболевание. Источник инфекции – больной человек, обычно заразен в течение 3 – 5 лет; больные с поздними формами сифилиса не заразны. Заражение в подавляющем большинстве случаев происходит при различных видах половых и бытовых контактов, редко трансплацентарным путем от больной матери ребенку (врожденный сифилис) или как профессиональное заражение контактным путем у медицинского персонала. В естественных условиях сифилисом болеет только человек, в эксперименте возможно заражение обезьян, хомячков и кроликов. У обезьян в месте введения трепонем развивается твердый шанкр, у кроликов и хомячков инфекция протекает бессимптомно.
Патогенез и клиника. Инкубационный период при приобретенном сифилисе варьирует от 2 до 10 нед., обычно 20 – 28 дней. Входными воротами инфекции чаще всего являются слизистые оболочки половых органов, реже – полости рта, а также поврежденная кожа. В месте внедрения возбудитель размножается, формируется первичная сифилома (твердый шанкр) – эрозия или язва с уплотненным основанием. Далее возбудитель попадает в лимфатическую систему, развивается лимфангоит и регионарный лимфаденит. Это типичная клиника первичного сифилиса, который продолжается 1,5 – 2 мес. Потом эти признаки исчезают. Вторичный период сифилиса связан с генерализацией процесса, когда увеличиваются многие лимфатические узлы, а на коже и слизистых оболочках появляются высыпания; могут наблюдаться поражения внутренних органов и нервной системы. Различают вторичный свежий и вторичный рецидивирующий сифилис. При каждом последующем рецидиве интенсивность сыпи становится все менее выраженной, а периоды между рецидивами увеличиваются. В элементах сыпи содержится большое количество живых трепонем, в этот период больной наиболее заразен. Продолжительность вторичного сифилиса – до 4 лет и более. Далее болезнь вступает в длительный бессимптомный период, по прошествии которого, через несколько лет, развивается третичный сифилис. При этом наблюдаются грубые органические поражения внутренних органов, сердечно-сосудистой системы, ЦНС, костей, формируются гуммы, сопровождающиеся распадом ткани и дегенеративными изменениями. Характерной клинической особенностью сифилиса является отсутствие каких-либо субъективных жалоб со стороны больного (боль, зуд, жжение и т. д.).
Иммунитет. Против сифилиса ни естественного, ни искусственного иммунитета не возникает; есть только инфекционный иммунитет, и пока он существует, человек практически не восприимчив к новому заражению. Инфекционный иммунитет развивается через 10 – 11 дней после появления твердого шанкра (шанкерный иммунитет), в этот период повторное заражение или не наблюдается, или новый образовавшийся шанкр протекает абортивно (суперинфекция). В дальнейшем при суперинфицировании характер возникающих поражений соответствует стадии болезни в момент повторного заражения. Суперинфекция объясняется временным ослаблением или «срывом» инфекционного иммунитета. От суперинфекции необходимо отличать реинфекцию, т. е. новое, повторное заражение человека, ранее болевшего сифилисом (излечившегося) и, следовательно, утратившего инфекционный иммунитет. Описаны случаи даже трехкратного заболевания сифилисом. Инкубационный период у таких больных короче, чаще развиваются множественные язвенные шанкры с лимфаденитом, серологические реакции становятся положительными раньше. Во вторичном периоде папулы на коже нередко эрозируются. Это объясняется тем, что при сифилисе развивается реакция гиперчувствительности замедленного типа, после излечения в организме длительно сохраняются сенсибилизированные лимфоциты. Инфекционный иммунитет имеет нестерильный характер и обусловлен гуморальными факторами: в сыворотке больного обнаруживаются иммуноглобулины классов G, A и М.
Лабораторная диагностика. Для диагностики сифилиса оптимален комплексный подход, предполагающий одновременное использование нескольких методов. Их традиционно подразделяют на прямые, позволяющие доказать наличие возбудителя в исследуемом материале (заражение животных, различные виды микроскопии и молекулярно-генетические методы детекции ДНК T. pallidum – ПЦР и ДНК-зондирование), и непрямые – серологические тесты для выявления антител. В свою очередь, серологические тесты представлены нетрепонемными и трепонемными.
Исследуемым материалом для обнаружения трепонем в прямых методах является отделяемое твердого шанкра или его пунктат, пунктат лимфатического узла, соскоб из розеолы, ликвор. Лучше всего в нативном материале возбудитель выявляется темнопольной (см. рис. 111.4) или фазово-контрастной микроскопией, что позволяет наблюдать разные типы движения живого возбудителя. Если уже начато лечение антибиотиками, возбудителя в патологическом материале обнаружить невозможно. При необходимости проводят прямую (или непрямую) РИФ или окрашивают препарат по Романовскому – Гимзе. Эти методы используют только для ранней диагностики сифилиса.
Серологические тесты можно использовать на различных стадиях заболевания, кроме серонегативного первичного сифилиса. Обычно применяют комплекс серологических реакций. К нетрепонемным тестам с визуальным определением результатов относятся: реакция связывания комплемента (реакция Вассермана = РСКк = RW) с кардиолипиновым антигеном сердечной мышцы быка (перекрестно реагирующий антиген), реакция микропреципитации (МР, или РМП) – микрореакция с плазмой и инактивированной сывороткой; RPR – тест быстрых плазменных реагинов, и другие реакции. Специалисты считают, что для массового обследования лучше всего применять два теста: RPR и РПГА или ИФА, так как RPR более чувствителен при первичном сифилисе, РПГА – на более поздних стадиях заболевания, а ИФА – на всех стадиях. К нетрепонемным тестам с микроскопическим считыванием результатов относятся VDRL-тест и USR-тест. Нетрепонемные тесты используют в качестве отборочных (скрининговых), так как они могут давать ложноположительные результаты. В трепонемных тестах используют антигены трепонемного происхождения. Их применяют для подтверждения результатов нетрепонемных тестов (ложноположительны?) при клиническом, эпидемиологическом и анамнестическом подозрении на сифилис, для диагностики скрытых и поздних форм, для ретроспективного диагноза. К трепонемным тестам относят: РСКт (РСК с трепонемным антигеном), РИБТ (или РИТ) – реакция иммобилизации бледных трепонем, РИФ (одна из лучших реакций), РПГА, ИФА, иммуноблотинг.
Специфическая профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая профилактика предусматривает воздержание от случайных половых связей, раннее выявление больных, особенно со скрытой формой заболевания, и их своевременное и эффективное лечение. Для лечения сифилиса используют антибиотики: пенициллин и его производные (водорастворимые и дюрантные формы), иногда эритромицин. Используют также препараты висмута, мышьяка, ртути.
| <<< Назад
|
Вперед >>>
|
Содержание статьи
